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兔Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)Elisa試劑盒說(shuō)明書

發(fā)表時(shí)間:2025/6/16  |  點(diǎn)擊率:72
 
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  兔Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)Elisa試劑盒說(shuō)明書

  以下是天正信達(dá)對(duì)兔Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒說(shuō)明書的核心內(nèi)容及操作要點(diǎn):

  BS-4220   兔子Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒  96T/48T

  一、?實(shí)驗(yàn)原理?

  采用雙抗體夾心法檢測(cè)樣本中PⅢNT濃度。包被抗體與樣本中的PⅢNT結(jié)合后,依次加入標(biāo)記抗體、HRP標(biāo)記親和素及TMB底物顯色,顏色深度與目標(biāo)物濃度成正比。

  二、?試劑盒組成?

  預(yù)包被微孔板(96T/48T)

  PⅢNT標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉,需蒸餾水復(fù)溶)

  生物素標(biāo)記抗體、HRP標(biāo)記親和素

  TMB底物A/B液、終止液(2M H?SO?)

  30×濃縮洗滌液(需稀釋)

  三、?樣本處理?

  血清/血漿?:

  全血室溫凝固10-20分鐘后,2000-3000rpm離心20分鐘,避免溶血。

  血漿需用EDTA/肝素抗凝,離心后分裝保存于-20℃(避免反復(fù)凍融)。

  組織勻漿?:PBS勻漿后離心取上清。

  四、?操作步驟?

  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:按說(shuō)明書梯度稀釋(通常設(shè)5-7個(gè)濃度點(diǎn))。

  加樣?:

  標(biāo)準(zhǔn)品孔:50μL/孔

  樣本孔:10μL樣本+40μL稀釋液(5倍稀釋)。

  溫育?:37℃孵育30分鐘,洗滌5次(拍干)。

  顯色?:依次加底物A/B各50μL,37℃避光反應(yīng)15分鐘。

  終止與檢測(cè)?:加終止液后15分鐘內(nèi)測(cè)450nm OD值。

  五、?注意事項(xiàng)?

  試劑保存?:未開(kāi)封試劑盒2-8℃保存;復(fù)溶標(biāo)準(zhǔn)品需棄用剩余部分。

  操作規(guī)范?:

  使用一次性吸頭避免交叉污染。

  洗滌時(shí)避免金屬器械接觸底物/終止液。

  質(zhì)量控制?:空白孔OD值應(yīng)<0.2,標(biāo)準(zhǔn)曲線R2≥0.99。

  六、?結(jié)果計(jì)算?

  以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,樣本濃度通過(guò)曲線方程計(jì)算后乘以稀釋倍數(shù)。

  注:以上資料僅供參考,如需更詳細(xì)說(shuō)明,可參考具體品牌商附帶產(chǎn)品信息。

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