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ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題及預(yù)防措施

更新時(shí)間:2025-12-05  |  點(diǎn)擊率:77

       標(biāo)簽:ELISA試劑盒  天正信達(dá)試劑盒 生物試劑 酶標(biāo)板 吸頭 標(biāo)準(zhǔn)品


  ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題及預(yù)防措施

  一、ELISA操作流程技術(shù)要點(diǎn)

  加樣細(xì)節(jié)?:

  使用專用加樣器,避免氣泡產(chǎn)生,槍頭不可觸及孔壁?。

  不同試劑更換吸頭,防止交叉污染?。

  加樣量需準(zhǔn)確,避免孔間不一致。

  孵育控制?:

  嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)溫度(通常37℃)和時(shí)間(如1小時(shí))孵育,避免溫度波動(dòng)?。

  孵育期間確保酶標(biāo)板平放,避免液體溢出?。

  洗滌性?:

  洗滌液現(xiàn)用現(xiàn)配,每孔注滿洗滌液,浸泡時(shí)間一致(30-60秒)?。

  甩板時(shí)快速翻轉(zhuǎn)120-150度,避免殘留液體污染相鄰孔?。

  樣本處理?:

  避免溶血和反復(fù)凍融,分裝后-20℃或-70℃保存。

  混勻時(shí)輕柔顛倒,避免劇烈振蕩。

  試劑保存?:

  試劑盒4℃-8℃冷藏,避免冷凍;使用前室溫回溫40-60分鐘?。

  標(biāo)準(zhǔn)品分裝后-20℃保存,嚴(yán)禁反復(fù)凍融?。

  二、常見(jiàn)問(wèn)題及預(yù)防措施

  背景顏色深/非特異性染色?:

  原因:洗滌不充分、試劑污染、顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)?。

  措施:嚴(yán)格洗滌步驟,更換吸頭,控制顯色時(shí)間?。

  所有孔均無(wú)明顯顏色?:

  原因:試劑混淆、酶標(biāo)物失活、遺漏步驟?。

  措施:核對(duì)試劑標(biāo)簽,檢查有效期,按流程操作?。

  標(biāo)準(zhǔn)曲線不佳?:

  原因:標(biāo)準(zhǔn)品配制錯(cuò)誤、儲(chǔ)存不當(dāng)、稀釋過(guò)早?。

  措施:現(xiàn)配現(xiàn)用,避免室溫放置過(guò)久,按說(shuō)明書(shū)稀釋?。

  重復(fù)性差?:

  原因:加樣不準(zhǔn)、孔間污染、儀器問(wèn)題。

  措施:校準(zhǔn)加樣器,避免交叉污染,定期維護(hù)儀器。

  注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。

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