ELISA試劑盒操作流程及技術(shù)要點(diǎn)

　　一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

　　試劑解凍與平衡?：從冰箱取出試劑盒后，2-8℃解凍30分鐘，再室溫平衡30分鐘?。

　　試劑配制?：

　　標(biāo)準(zhǔn)品?：凍干標(biāo)準(zhǔn)品用稀釋液溶解后，按梯度稀釋(如2000→0 pg/mL)?。

　　洗滌液?：濃縮液按1:25稀釋，混勻后使用?。

　　抗體工作液?：生物素化抗體按1:100稀釋，現(xiàn)配現(xiàn)用?。

　　二、操作流程

　　加樣與孵育?：

　　標(biāo)準(zhǔn)品/樣本每孔100μL，37℃孵育90分鐘?。

　　加入生物素化抗體工作液，孵育60分鐘?。

　　洗滌?：每孔300μL洗滌液，浸泡30秒，重復(fù)3-5次?。

　　顯色與終止?：

　　加入底物溶液，避光孵育10-20分鐘?。

　　每孔50μL終止液，5分鐘內(nèi)測(cè)OD450值?。

　　三、技術(shù)要點(diǎn)

　　加樣細(xì)節(jié)?：避免槍頭觸底，防止氣泡和交叉污染?。

　　孵育時(shí)間控制?：嚴(yán)格計(jì)時(shí)，避免反應(yīng)不充分或過(guò)度?。

　　洗滌性?：拍干孔內(nèi)液體，確保背景干凈。

　　四、注意事項(xiàng)

　　樣本處理?：避免溶血和反復(fù)凍融?。

　　試劑保存?：剩余試劑2-8℃存放，避免污染?。

　　快速檢測(cè)?：一步法ELISA僅需1小時(shí)，適合緊急實(shí)驗(yàn)。

　　注：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。

　　天津天正信達(dá)供應(yīng)：RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進(jìn)樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實(shí)驗(yàn)耗材，我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)，主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機(jī)、全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀、高速落地離心機(jī)和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。