qPCR SYBR® Green Master Mix (No Rox)  產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

      qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)是 2×實(shí)時(shí)定量 PCR 擴(kuò)增的預(yù)混合溶液。Mix中含有熱啟動(dòng)  DNA Polymerase 、SYBR Green I 、dNTPs、Mg2+ 。使用時(shí)‘’僅需在擴(kuò)增體系中加入模板和引物即可進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量 PCR ，大大簡(jiǎn)化操作過(guò)程，降低污染幾率。

      本品采用的 DNA 聚合酶配體可以隨溫度變化實(shí)時(shí)調(diào)節(jié) DNA 聚合酶活性。配方添加了有效抑制非特異性 PCR 擴(kuò)增的因 子和提升 PCR 反應(yīng)擴(kuò)增效率的因子，使定量 PCR 可以在寬廣的定量區(qū)域內(nèi)獲得良好的線(xiàn)性關(guān)系。

適用機(jī)型

Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20℃保存，有效期18個(gè)月。

本品避免反復(fù)凍融。 產(chǎn)品中含有熒光染料 SYBR Green I，保存或配制反應(yīng)體系時(shí)需避免強(qiáng)光照射。

注意事項(xiàng)

1）推薦使用本公司 cDNA 合成試劑盒，以有效去除 RNA樣品中殘留的基因組。

2）解凍后 Master Mix 可能出現(xiàn)絮狀物質(zhì)，4℃放置并上下顛倒混勻至溶液澄清，不影響試劑性能。

3）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

4）本產(chǎn)品僅作科研用途！

反應(yīng)體系（推薦冰上配制）

【注】： 使用前務(wù)必充分混勻， 避免劇烈震蕩產(chǎn)生過(guò)多氣泡。

a)  引物濃度：通常引物終濃度為0.2 μM，也可以根據(jù)情況在 0.1- 1.0 μM 之間進(jìn)行調(diào)整。

b)  模板濃度：如模板類(lèi)型為未稀釋 cDNA 原液，使用體積不應(yīng)超過(guò) qPCR 反應(yīng)總體積的 1/10。

c)  模板稀釋?zhuān)篶DNA 原液建議 5- 10 倍稀釋?zhuān)罴涯０寮尤肓恳詳U(kuò)增得到的 CT 值在 20-30 個(gè)循環(huán)為好。

d)  反應(yīng)體系：推薦使用20 μL 或 50 μL ，以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性。

e)  體系配制：請(qǐng)于超凈工作臺(tái)內(nèi)配制， 并使用無(wú)核酸酶殘留的槍頭、反應(yīng)管； 推薦使用帶濾芯的槍頭。避免交叉污染 和氣溶膠污染。

擴(kuò)增程序 （兩步法）

擴(kuò)增程序 （三步法）

【注】高特異性可選擇兩步法，高效率擴(kuò)增可選擇三步法。

qPCR SYBR® Green Master Mix (No Rox) 天津天正信達(dá)供應(yīng)：RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進(jìn)樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實(shí)驗(yàn)耗材，移液器等我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專(zhuān)業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)，主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機(jī)、全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀、高速落地離心機(jī)和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。