以下是關(guān)于人白介素12(IL-12)ELISA試劑盒的說明書核心內(nèi)容整理：

　　一、檢測原理?

　　采用雙抗體夾心法，通過預(yù)包被抗人IL-12抗體捕獲樣本中的IL-12，再與生物素標(biāo)記的二抗及HRP酶聯(lián)物結(jié)合，最終經(jīng)TMB顯色定量檢測。

　　二、試劑盒組成?

　　組分? ?規(guī)格? ?保存條件?

　　預(yù)包被酶標(biāo)板 96孔/板(12孔×8條) 2-8℃干燥保存

　　重組IL-12標(biāo)準(zhǔn)品 2ng/瓶或10ng/管 -20℃凍存

　　HRP標(biāo)記檢測抗體 6-12ml/瓶 2-8℃避光

　　TMB底物液 12ml/瓶 2-8℃避光

　　20×濃縮洗滌液 50ml/瓶 室溫(使用前稀釋)

　　三、樣本要求?

　　類型?：血清、血漿(EDTA/肝素抗凝)、細(xì)胞上清液、組織勻漿

　　處理?：

　　避免溶血或反復(fù)凍融;

　　含NaN3的樣本需透析處理(NaN3抑制HRP活性);

　　短期保存于-20℃，長期保存需-80℃。

　　四、操作步驟?

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：按說明書梯度稀釋(如60ng/L→3.75ng/L);

　　加樣溫育?：

　　樣本/標(biāo)準(zhǔn)品50μL/孔，37℃孵育60分鐘;

　　加入HRP標(biāo)記抗體100μL/孔，繼續(xù)孵育60分鐘;

　　洗滌?：手工洗板需重復(fù)5次，拍干;

　　顯色?：加入TMB底物50μL/孔，避光反應(yīng)15分鐘;

　　終止與檢測?：加終止液50μL/孔，15分鐘內(nèi)450nm測OD值。

　　五、技術(shù)參數(shù)?

　　項(xiàng)目? ?規(guī)格?

　　檢測范圍 15.63-2000pg/mL(不同品牌差異)

　　靈敏度 <5.47pg/mL

　　批內(nèi)/批間精密度 CV<8%/CV<10%

　　有效期 6個(gè)月(2-8℃保存)

　　六、注意事項(xiàng)?

　　安全操作?：

　　避免接觸終止液(含硫酸)和TMB底物，接觸后立即沖洗;

　　質(zhì)量控制?：

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線R2需≥0.99;

　　空白孔OD值應(yīng)<0.1。

　　適用范圍?：僅限科研，不用于臨床診斷。

　　如需具體品牌操作細(xì)節(jié)，請參考對應(yīng)試劑盒說明書。

　　注：以上資料僅供參考，不作為實(shí)際標(biāo)準(zhǔn)，如需更詳細(xì)的標(biāo)準(zhǔn)對比，可進(jìn)一步詢技術(shù)老師或是供應(yīng)品牌商。