多酚氧化酶(PPO)測試盒應(yīng)該怎么使用
多酚氧化酶(PPO)測試盒使用步驟
試劑準(zhǔn)備?
使用前將試劑充分混勻,按說明書準(zhǔn)確稀釋,避免濃度偏差?。
若為微板法,需檢查微孔板是否完好,確保與試劑兼容?。
樣品處理?
植物樣本(如馬鈴薯)需低溫保存,避免酶活性損失?。
稱取5g組織,加入緩沖液研磨成勻漿,離心后取上清液定容?。
土壤樣本需按試劑盒要求預(yù)處理,避免引入抑制劑?。
酶活測定?
分光光度法?:
設(shè)置對(duì)照管與測定管,加入鄰苯二酚底物,37℃水浴反應(yīng)10分鐘?。
加入溶液終止反應(yīng),離心后測定525nm吸光值?。
微板法?:
按試劑盒步驟加樣,避免氣泡,使用微孔板讀取吸光度?。
結(jié)果計(jì)算?
酶活性單位定義為1g鮮樣1分鐘內(nèi)吸光值變化0.01所需的酶量?。
注意事項(xiàng)?
嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度、時(shí)間及pH值?。
設(shè)置空白對(duì)照和重復(fù)樣本,提高數(shù)據(jù)可靠性?。
實(shí)驗(yàn)后及時(shí)清洗器具,避免交叉污染?。
需要幫你整理一份不同樣本(植物/土壤)的預(yù)處理對(duì)照表嗎?
注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。
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