PCR擴增時用的Taq酶和Pfu酶有何區(qū)別?

　　以下是Taq酶與Pfu酶(高保真酶)的核心區(qū)別及適用場景分析：

　　1. ?保真度與錯配率?

　　Taq酶?：無3'→5'外切酶活性(無校對功能)，錯配率約10??(每萬堿基1個錯誤)?。

　　Pfu酶?：具備3'→5'外切酶活性(校對功能)，錯配率低至10??(每百萬堿基1個錯誤)?。

　　2. ?產(chǎn)物末端特性?

　　Taq酶?：擴增產(chǎn)物3'端帶A尾，適合TA克隆?。

　　Pfu酶?：產(chǎn)生平末端，需平端連接或特殊載體?。

　　3. ?擴增效率與速度?

　　Taq酶?：延伸速度快(1500-3000堿基/分鐘)，適合常規(guī)PCR?。

　　Pfu酶?：因校對機制延伸較慢(約10-20堿基/秒)，但長片段擴增能力更強(可達5-19kb)?。

　　4. ?應(yīng)用場景?

　　Taq酶?：基因分型、菌落PCR、TA克隆等對精度要求不高的場景?。

　　Pfu酶?：NGS建庫、基因合成、定點突變等需高準(zhǔn)確性的實驗?。

　　5. ?熱穩(wěn)定性與成本?

　　熱穩(wěn)定性?：Pfu酶在95℃下半衰期比Taq酶高20倍?。

　　成本?：Pfu酶價格通常為Taq酶的2-3倍?。

　　選擇建議?：若需快速擴增且允許一定錯誤率(如檢測有無)，選Taq酶;若需精確序列(如克隆、測序)，優(yōu)先Pfu酶?。

　　注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。

　　天津天正信達供應(yīng)：RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實驗耗材，我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實驗技術(shù)平臺，主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機、全波長酶標(biāo)儀、高速落地離心機和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。