如何避免ELISA實(shí)驗(yàn)中的樣本污染?

　　在ELISA實(shí)驗(yàn)中避免樣本污染需從樣本處理、操作規(guī)范及環(huán)境控制三方面綜合防控：

　　一、樣本處理規(guī)范

　　避免溶血與細(xì)菌污染?

　　溶血樣本中的血紅蛋白具有類(lèi)過(guò)氧化物酶活性，易導(dǎo)致假陽(yáng)性;細(xì)菌污染可能降解酶標(biāo)物或產(chǎn)生干擾酶?。建議采集后立即離心分離血清，避免反復(fù)凍融破壞蛋白結(jié)構(gòu)?。

　　樣本保存與稀釋?

　　短期保存需2-8℃，長(zhǎng)期應(yīng)-70℃以下，使用前室溫平衡30分鐘?。稀釋時(shí)需使用同一移液器和槍頭，避免交叉污染?。

　　二、操作流程控制

　　分區(qū)操作與耗材管理?

　　嚴(yán)格劃分樣本制備區(qū)、加樣區(qū)、孵育區(qū)，使用物理屏障隔離?。酶標(biāo)物需分裝保存，避免反復(fù)開(kāi)瓶污染?。

　　加樣與洗滌規(guī)范?

　　加樣需垂直操作，避免液體飛濺;每份樣本更換槍頭，定期校準(zhǔn)移液器?。洗滌時(shí)確保洗液注滿孔位，拍板力度適中，避免殘留?。

　　三、環(huán)境與儀器管理

　　溫育與顯色控制?

　　孵育溫度需穩(wěn)定在37℃，顯色時(shí)間嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)控制，避光操作以減少非特異性顯色?。

　　儀器維護(hù)?

　　定期檢查洗板機(jī)管道是否堵塞，酶標(biāo)儀濾光片需清潔，避免負(fù)值干擾。高滴度樣本檢測(cè)后需清潔儀器?。

　　通過(guò)上述措施可有效降低ELISA實(shí)驗(yàn)中的樣本污染風(fēng)險(xiǎn)，確保結(jié)果準(zhǔn)確性?。

　　注：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢(xún)技術(shù)老師。

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